番茄漆酶基因lelacmir397的克隆与表达分析

通过blast分析，获得了番茄漆酶（laccase，lac）基因相关的15个est片段，并对这些est进行了同源比较和序列拼接，得到1个含有小分子rnamir397识别位点的lac片段，命名为lelacmir397。根据蛋白质结构域推测，lelacmir397蛋白存在1个cu–氧化酶结构域。lelacmir397时空表达分析表明，其在番茄根、花、成熟果实和愈伤组织中特异性表达，而在叶中不表达。根据该片段的核苷酸序列信息进行5′-和3′-race扩增，得到了番茄lac基因的全长cdna（lelacmir397，登录号eu503151），其在番茄基因组中对应的基因为solyc07g049460.2.1。通过在番茄中过表达mir397a基因，发现转基因番茄中lelacmir397表达量降低，同时其ppo、pod、sod含量也有所下降。用丁香酸和芥子酸处理转基因植株幼苗，其根系比非转基因植株更长，抗性增强，表明lelacmir397与番茄植株的抗性反应有关。