矮生观赏杉木dna甲基化的水平与模式分析

为探讨杉木矮化变异与dna甲基化的关系，以矮生观赏杉木与野生杉木为试验材料，采用基于dna甲基化敏感扩增多态性分析（methylation-sensitiveamplificationpolymorphism，msap）方法，研究其dna序列ccgg位点的甲基化水平及模式变化特征。应用20个引物组合，在矮生观赏杉木和野生杉木的叶片dna中均检测出745个ccgg位点，其中甲基化位点数分别为508个和505个，分别占总扩增位点数的68.17%和67.83%；在矮生观赏杉木与野生杉木木质部dna中分别检测到742个和737个ccgg位点，其中甲基化位点数分别为471个与498个，分别占总扩增位点数的63.52%和67.51%，差异达极显著水平（p<0.01）。与野生型相比，矮生观赏杉木叶片和木质部dna甲基化模式发生了一定变化，在叶片dna中，去甲基化率为17.81%，明显高于超甲基化率15.44%；在木质部dna中，去甲基化率17.25%，也明显高于超甲基化率14.65%。通过甲基化序列的初步克隆及比对分析发现，矮生观赏杉木中参与mapk级联途径的蛋白磷酸酶ibr5基因启动子区域的甲基化水平上升。因此推测，植物激素信号转导及其调控基因的甲基化变化可能是矮生观赏杉木形成的原因之一。