三七rnase-like基因的克隆及表达分析

采用同源序列克隆法，结合race技术，从三七[panaxnotoginseng（burk.）f.h]根茎总rna中克隆次生代谢相关差异表达rnase-like贮藏蛋白的编码序列，并进一步以dna为模板扩增全长基因，获得一条开放阅读框为717bp的cdna序列，命名为pmp（genbank，kc751542)，相应基因全长1074bp。序列及其进化分析表明，该基因包含3个外显子和2个内含子，编码238个氨基酸，相应蛋白质的分子量为27.47kd，含有核苷酸结合的保守区域，属于rnase-t2超家族成员。三七pmp蛋白与人参rnase-like贮藏蛋白高度同源，序列相似性达95%。实时荧光定量pcr研究表明，三七pmp基因在其根、茎、叶、花等器官中均有表达，且3年生根中表达量最高，暗示该基因可能参与三七皂苷次生代谢调控及其品质形成。