狗蔷薇细胞分裂素氧化酶基因rcckx5的克隆及表达分析

利用race技术从狗蔷薇（rosacanina）类根体中克隆得到1个细胞分裂素氧化酶基因cdna全长，命名为rcckx5。序列分析表明，rcckx5cdna全长1815bp，5′utr104bp，orf1626bp，3′utr85bp，编码541个氨基酸，具有ckx家族典型的fad（黄素腺嘌呤二核苷酸）结合域和ck（细胞分裂素）结合域。氨基酸序列多重比对和系统进化树分析显示rcckx5与可可tcckx5亲缘关系最近，与拟南芥atckx5、乌拉尔图小麦tuckx5同源性较高。荧光定量pcr分析表明，狗蔷薇rcckx5在其根、茎、叶、花、果实中均有表达，根中相对表达量最高，花和果实中相对表达量较高。在狗蔷薇类根体形成发育过程中rcckx5的相对表达量不断升高，21d时达到最高，随后稍有下降，表明其可能参与了类根体的形成。6-ba处理结果表明rcckx5能够快速响应6-ba的诱导，表达量显著上调，2.5mg·l-16-ba处理120h时，rcckx5的相对表达量达到最高峰。