龙眼胚性愈伤组织remorin家族成员的克隆及其在体胚发生过程中的表达分析

以龙眼松散形胚性愈伤组织为材料，采用rt-pcr结合race法克隆remorin家族5个成员的cdna全长，dlremorin1全长2127bp，编码572个氨基酸；dlremorin2全长1829bp，编码444个氨基酸；dlremorin3全长1937bp，编码541个氨基酸；dlremorin4全长1743bp，编码466个氨基酸；dlremorin5全长1043bp，编码181个氨基酸。dlremorin1~5dna序列长度分别为：4054、3097、3505、4690和1935bp，所有内含子剪切位点均符合真核生物“gt-ag”规则。所有成员均是不稳定亲水性蛋白，都不具有信号肽，只有dlremorin1具有跨膜结构，都具有remorin家族保守结构域，与其它植物的remorin具有较高的同源性。系统进化树分析结果表明，dlremorin5为经典的remorin蛋白，dlremorin1与dlremorin2属于长链remorin。qrt-pcr结果显示，随着龙眼体胚的发育，dlremorin1的表达量呈类“n”状趋势，在心形胚时期和子叶形胚时期较高；dlremorin2在心形胚和子叶形胚时期迅速下降；dlremorin3在发育中后期迅速升高，并在子叶形胚时期最高；dlremorin4在球形胚和鱼雷形胚时期最低，而dlremorin5在不完全胚性紧实结构时期最低。说明dlremorin1~5在龙眼体胚发生过程的转录水平具有一定的组织特异性和时序性。psrnatarget预测显示dlremorin还可能受到mirna家族的调控。