苹果mdga20ox1基因的克隆、亚细胞定位及表达分析

以苹果砧木sh40[（malus×domestica）×m.honanensis]为试材，采用rt-pcr结合race技术从sh40茎尖中克隆得到一个赤霉素合成关键酶基因（ga20–氧化酶基因），命名为mdga20ox1，其cdna全长1579bp，编码392个氨基酸。该基因在genbank登录号为kc493633。氨基酸序列同源性分析表明：mdga20ox1与玉米、拟南芥、梨等植物ga20ox具有55.9%~96.7%的相似性。洋葱表皮细胞瞬时表达显示，mdga20ox1蛋白定位于细胞核与细胞质膜。植株生长量测定和相对定量表达结果表明，mdga20ox1基因在砧木sh28、sh40和m26自根苗的表达呈先下降再上升然后下降的趋势，这与其生长动态基本一致。嘎啦/sh28的植株生长量和mdga20ox1表达量最高，嘎啦/m26次之，嘎啦/sh40最低，初步表明该基因的表达有与苹果植株矮化程度呈负相关的趋势。mdga20ox1在嘎啦/sh40和嘎啦/sh28不同组织中的表达模式一致，且半矮化类型砧木sh28嫁接‘嘎啦’，其茎尖、幼叶、成熟叶和枝皮中的表达量均高于矮化类型sh40嫁接‘嘎啦’。