开花负调因子芥菜bjsvp与甘蓝boflc的异源互作研究

为阐明开花负调因子bjsvp（源于种子春化型作物芥菜）与boflc（源于绿体春化作物甘蓝）异源聚合后在开花调控路径中的互作机制，从芥菜酵母重组质粒pgadt7-bjsvp分别亚克隆含mi、mik、k、ikc、kc、ik、ik1l1k2l2、ik1l1k2、ik1l1、ik1、i结构域的11个svp截短体（bjsvpδ1~bjsvpδ11），构建猎物质粒pgadt7-bjsvpδ1~pgadt7-bjsvpδ11并转化酵母y187菌；从甘蓝中克隆了boflc和boflczq基因，构建诱饵质粒pgbkt7-boflc、pgbkt7-boflczq并转化酵母y2hgold菌。酵母双杂交表明：芥菜bjsvp能与甘蓝boflc相互作用，在qdo/x/a培养基上长出蓝色菌落，激活酵母报告基因aur1-c、his3、ade2、mel1。截短体bjsvpδ2~bjsvpδ5也能与boflc相互作用，而bjsvpδ7~bjsvpδ11不能与boflc互作。由此表明bjsvp完整的k域（bjsvp3）可独立作用于boflc，但k域亚域（k1、k2、k3）或者连接区（l1、l2）缺失突变后不能介导该作用。作用强度分析表明：bjsvp的i域能增强该蛋白互作，但m域和c域可能会干扰该作用；芥菜bjflc被甘蓝boflc或boflczq替换后，可明显增加作用强度；甘蓝flc的i域第20位、k域第65位和c域第32位氨基酸的变异很可能与作用强度相关。