拟南芥at-pri-mir828基因的克隆及其对番茄的遗传转化

microrna828（mirna828）是一种新近发现的生物学功能还未全面研究的mirna。为从不同角度阐明mirna828的生物学功能，从拟南芥中克隆到at-pri-mir828基因并构建了该基因过量表达的植物表达载体pc2300-pot2-at-pri-mir828，通过农杆菌介导的叶盘法将pc2300-pot2-at-pri-mir828导入异源植物番茄品种‘ailsacraig’中。pcr鉴定结果显示，外源基因at-pri-mir828已成功整合到转基因番茄基因组中，共获得9个转基因株系，67株转基因植株。定量pcr检测结果显示，与野生型番茄植株相比，转基因植株中mir828的表达量显著增加，而生物信息学所预测的mir828靶基因sly-myb-like1的表达水平则相应降低。花青素含量测定结果显示，mir828过量表达的转基因番茄植株花青素含量明显低于野生型植株，表明mir828参与了番茄花青素的生物合成调控。