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园艺学报 2012
cry2aa2和pampap双价表达载体的构建及其对辣椒的遗传转化Keywords: 辣椒,pmi/甘露糖筛选体系,cry2aa2,pampap,遗传转化,抗病毒,抗虫害 Abstract: 为了获得既抗虫又抗病毒病,又对人体和环境安全的转基因辣椒(capsicumannuuml.)材料,将启动子camv35s、终止子nos-ter及缺失无毒型商陆抗病毒蛋白基因pampap一起插入到植物表达载体pcambia1301-cry2aa2-pmi的多克隆位点上,构建双价表达载体,采用农杆菌介导法将其转入辣椒中,并用pmi/甘露糖筛选体系对转化植株筛选。经pcr扩增和southern杂交检测,结果表明cry2aa2和pampap已经整合到辣椒基因组中。进一步经rt-pcr分析,证实cry2aa2和pampap在t0代转基因辣椒植株中共表达。经抗虫性、抗病毒病表型鉴定:t0代转基因辣椒植株对黄瓜花叶病毒(cmv)和斜纹夜蛾幼虫的抗性均显著高于非转基因植株。
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