月季乙烯受体基因的全长克隆及原核表达分析

利用已构建的月季花朵转录组数据库，筛选得到了22个与乙烯受体同源性较高的unigene片段，并利用这些片段从月季花瓣中克隆得到了3个乙烯受体基因全长，分别为rhetr1、rhetr3和rhetr5。其中，rhetr1全长为2814bp，编码一个595aa的肽链；rhetr3全长为2468bp，编码一个765aa的肽链；rhetr5全长2740bp，编码一个742aa的肽链。这3个基因推定的编码蛋白分别与枣（ziziphusjujuba）中的zjetr1、杨树（populustrichocarpa）中的ptetr2和砂梨（pyruspyrifolia）中的ppers2同源性最高，依次为85.2%、75.8%和80.3%。蛋白同源性及结构分析表明，rhetr1和rhetr5分别与拟南芥中的ers1和etr1结构相似，属于第1亚家族成员，rhetr3与ers2结构相似，属于第2亚家族成员。在花朵自然瓶插过程中，这3个基因分别表现为下调、上调和组成型表达。利用原核表达载体，选择和月季花朵开放最为相关的rhetr3，获得了和理论分子量一致的重组蛋白，表明克隆得到的rhetr3具有完整的读码框。