利用amirna技术沉默矮牵牛查尔酮合成酶基因

转基因介导的基因沉默技术是进行基因功能分析和利用基因工程改良作物的重要手段。在植物中，amirna（artificialmicrorna）是具有高度特异性的基因沉默技术。根据amirna设计的原则设计了用于沉默矮牵牛查尔酮合成酶（chalconesynthase，chs）基因的amirna：amirchs1，用拟南芥mir319a的前体作为表达amirchs1的骨架，重叠pcr扩增，将天然mir319a序列替换成amirchs1，合成的dna片段置于35s启动子之后，转化导入矮牵牛。转基因植株花色变淡，花冠出现弥散的白色斑点或不规则的白色斑块，严重的几乎呈纯白色，花色素苷含量明显下降，chs的mrna含量明显降低，表明拟南芥mir319a的前体作为表达amirna的骨架在矮牵牛中可行，且能有效沉默结构基因。