菊花花发育基因cmco和cmft的克隆与表达分析

　利用同源序列法结合race技术从菊花‘神马’品种[chrysanthemummorflorium（ramat.）kitam.‘jinba’]中分离了开花时间相关的co（constans）和ft（floweringlocust）同源基因，并命名为cmco（基因登录号jf488070）和cmft（基因登录号jf488071）。cmco和cmft分别编码382和174个氨基酸。蛋白比对发现，cmco蛋白包含具有典型的co同源蛋白结构，包含b-box1，b-box2，cct结构域及cooh区域。cmft所推测的氨基酸序列包含ft类蛋白保守基序和两个关键性氨基酸残基。同源性分析表明，cmco与草莓（fragaria×ananassa）faco同源性最高，为65.8%，与豌豆（pisumsativum）pscol、拟南芥（arabidopsisthaliana）atco同源性分别为62.0%和55.6%。cmft与向日葵（helianthusannuus）haft2基因同源性最高，为93.7%，与葡萄（vitisvinifera）vvft和拟南芥atft的同源性分别为85.1%和74.0%。进化树聚类分析表明，cmco和cmft蛋白分别与向日葵haco和haft2遗传距离最近。rt-pcr表明，长日照下的菊花叶片中几乎检测不到cmco和cmft，而在短日照下，cmco在花芽分化启动期（ⅰ）表达，总苞鳞片分化前期（ⅱ）有所下降随后又迅速升高；cmft在cmco之后表达，之后持续高表达。选择小花原基分化前期（ⅳ）对菊花叶片、花芽和茎等不同组织器官cmco和cmft表达进行分析，结果表明，cmco在叶片中表达量最高，花芽次之，茎最低；cmft在花芽中表达量最高，叶片次之，茎最低。由此推测cmco和cmft的表达与光周期诱导菊花成花密切相关。