黄瓜液泡膜h+-ppass基因cuppase的cdna克隆、序列分析与表达

利用genbank登录的植物液泡膜焦磷酸酶氨基酸保守区序列设计简并引物,利用rt-pcr和race-pcr技术从黄瓜叶片中获得了一个液泡膜h+-ppase基因，命名为cuppase，genbank注册号为gq223786。cuppase蛋白与南瓜、绿豆同源性最高，分别为94%，92%。生物信息学分析表明，该基因全长2650bp，开放阅读框（orf）2307bp，编码768个氨基酸；cuppase蛋白大小约80kd，理论pi值为5.32。该基因有14个强的跨膜螺旋结构，plantcare分析结果显示该基因序列具有脱落酸诱导、生长素诱导、赤霉素诱导、水杨酸诱导、低温诱导、干旱诱导的顺式作用元件。rt-pcr表明，cuppase在叶和根中表达较高，茎中表达较低。cuppase表达受盐胁迫以及高温、低温胁迫诱导，但与处理时间有密切关系，其表达均表现先升高后降低的趋势。