琯溪蜜柚高分量核dna提取方法的建立

以琯溪蜜柚[citrusgrandis(l.)osbeck‘guanximiyou’]叶片为材料，比较了两种提取方法对高分子量核dna（hmw-dna）制备效果的影响。结果表明，改良zhang法与peterson法相比，前者更适合于琯溪蜜柚hmw-dna的提取。改良zhang法用温和的物理方法破碎细胞壁，在一定的渗透压下保证细胞核的完整性，运用miracloth和低速离心去除大部分的多糖和细胞壁碎片，经显微观察，所提取的细胞核完整、纯净、质量高；将这些细胞核用低熔点琼脂糖包埋，以琼脂糖小块的方式保存细胞核，以保持核的稳定；琼脂糖小块的最适消化时间为48h，脉冲场凝胶电泳分析结果表明所获得的hmw-dna大于1mb，这些核dna能够被限制性内切酶消化，适合于琯溪蜜柚bac基因组文库的构建。