3种苹果潜隐病毒多重rt-pcr检测体系的建立

研究建立了能同时检测苹果茎沟病毒(applestemgroovingvirus,asgv)、苹果褪绿叶斑病毒(applechloroticleafspotvirus,aclsv)和苹果茎痘病毒(applestempittingvirus,aspv)的多重rt-pcr方法。以复合感染3种病毒的苹果‘望山红’组培苗为试材,对影响多重pcr的反应条件进行了一系列的调整和优化。多重rt-pcr体系灵敏性测验显示,最低能从rna总量187.5ng的样品中检测3种病毒的存在。多重rt-pcr产物的序列与报道的病毒序列有较高的同源性,12个田间苹果样品的多重rt-pcr检测结果与单一pcr的结果一致,初步证明了多重rt-pcr检测的准确性。