葡萄a病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达

葡萄a病毒（grapevinevirusa,gva）是葡萄病毒属（vitivirus）的典型种，在世界葡萄产区广泛分布。采集10株“藤稔”葡萄成熟枝条，使用6种葡萄病毒elisa试剂盒检测发现10个样本中有6个感染4种不同的葡萄病毒。以gva的elisa阳性植株为材料进行rt-pcr扩增，首次获得了gva四川分离物sl10的完整外壳蛋白基因（cp）。该基因全长597bp，将其与genebank收录的15个gva分离物的cp序列进行比对和构建系统进化树。把不同地理起源的gva分离物分成2个变异组；其中ⅰ组包括3个分离物(与ⅱ组的其他分离物只有75.9%～80.1%的序列同一性)；其余的13个分离物组成ⅱ组（组内分离物具有84.4%～99.5%的序列同一性）。构建了gvacp的原核表达质粒pet-30-gvacp并转化bl21菌株，经iptg诱导，目的基因得到了大量表达。