番木瓜凝乳蛋白酶基因启动子的克隆及功能研究

采用pcr技术从番木瓜品种‘穗中红’克隆了木瓜凝乳蛋白酶基因的部分序列及其5'侧翼序列，构建含有两种长度启动子片段的植物表达载体，并用基因枪轰击番木瓜叶组织和农杆菌转化烟草叶盘。结果表明，克隆产物长719bp，163bp3'侧翼序列与genbank中的番木瓜凝乳蛋白酶基因序列同源性为99%，556bp的5'侧翼序列有基础启动子区，转录起始位点位于atg上游38bp的t。序列登录号为ay803756。预测在启动子区存在tata-box、caat-box、wun和hse等顺式作用元件。两种启动子片段驱动的gus基因瞬时表达和稳定表达结果表明，该启动子片段具有乳管特异表达活性。