多花蔷薇胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株

利用多花蔷薇‘无刺3号’假珠芽诱导的胚性愈伤细胞悬浮系分离得到原生质体，并培养获得再生植株。酶种类和浓度,酶解时间及悬浮细胞继代时间对原生质体分离有重要影响，最佳酶液组成是2.0%纤维素酶，0.5%离析酶，5.0mmol·l-1mes,0.5mol·l-1甘露醇，0.5%cacl2·2h2o。采用继代3d的悬浮细胞系，酶解10h，原生质体产量达到26.67×106g-1，原生质体活力为92.21%。采用液体浅层培养，肌醇比蔗糖更有利于纯化后的原生质体分裂和生长。愈伤组织形成增殖培养基为1/2ms+2,4-d1.0mg·l-1+ebr0.2mg·l-1+10g·l-1ficoll+500mg·l-1谷氨酰胺+20mg·l-1甘氨酸+20mg·l-1天冬氨酸，分化培养基为1/2ms+10mg·l-1tdz+500mg·l-1谷氨酰胺+20mg·l-1甘氨酸+20mg·l-1天冬氨酸，后转入1/2ms培养基上获得完整植株。