芹菜胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株

利用芹菜胚性细胞悬浮系成功分离得到大量原生质体,获得芹菜大量原生质体的最佳反应体系为:酶液组成为3.0%纤维素酶onozukar210、1.0%离析酶r210、11%甘露醇、0.5%cacl2·2h2o和0.1%mes;摇床转速为80r/min,温度(25±2)℃,酶解时间5～6h;原生质体产量为25.00×106/g,原生质体活力83.41%。原生质体浅层培养,培养基为1/2ms+1mg/l2,4-d+0.5mg/lkt+11%甘露醇+500mg/l水解络蛋白,两天后,重新再生细胞壁之后进行第1次分裂,逐步降低渗透压至甘露醇3%,大约30d形成小细胞团。小愈伤组织经增殖培养后在1/2ms+500mg/lch+0.25mg/lkt固体分化培养基诱导出不定芽,30d后再转入ms基本培养基,获得完整的再生植株。