月季突变体抑制差减杂交cdna文库构建及分析

为了分析月季花色花香突变机理和揭示花色花香代谢的相关基因,利用抑制性消减杂交技术分离了月季红花无香突变体‘往日情怀’(以下简称突变体)与其野生型金黄色浓香品系‘金银岛’(以下简称野生型)之间表达差异cdna片段。分别以突变体作为驱赶子,野生型为检测子,以及以野生型作为驱赶子,突变体为检测子建立了两个差异表达cdna文库wssh和jssh,分别代表在突变体和野生型中特异表达的cdna;再经文库高密度点阵膜的杂交差示筛选分析,在wssh库中获得特异表达的27个阳性克隆,在jssh文库中得到25个阳性克隆。差异表达克隆测序后经blast比对分析发现wssh文库中含有与红花突变体的花青素积累直接相关的chs、dfr、细胞色素p450加单氧酶、乙二醛酶ⅰ、己糖转移因子、myb1转录因子、s-腺苷蛋氨酸转移酶、adr等花色相关est;jssh文库中含有与野生型花香形成相关的月季甲基间苯二酚o-甲基转移酶、转醛醇酶、acyl-coa结合蛋白、钙调素结合蛋白、myb92转录因子的est以及导致芽变的ty1-copia-like逆转座子。