|
|
园艺学报 2007
以马铃薯nd2mrna为内对照双重rtpcr法检测马铃薯纺锤块茎类病毒, PP. 1213-1216 Keywords: 马铃薯,马铃薯纺锤块茎类病毒,双重rt-pcr,马铃薯线粒体nadhnd2mrna Abstract: 根据马铃薯纺锤块茎类病毒（pstvd）基因序列设计特异引物,采用反转录聚合酶链式反应（rt-pcr）技术进行pstvd检测研究。为避免由于提取的rna降解或者rt-pcr反应质量不高所造成的假阴性问题，在检测过程中引入马铃薯线粒体nadh脱氢酶nd2亚基基因mrna为内对照，该内对照的一个引物跨越了该基因内含子区域，只对剪接后的mrna进行特异扩增而不扩增其本身dna。利用内对照引物和pstvd特异引物进行双重rt-pcr检测，分别扩增出190bp的内对照基因特异片段和360bp的pstvd特异条带，与预期引物设计大小一致。引入的内对照可以较好地监控pstvd的rt-pcr检测过程。
|
