根癌农杆菌介导蓝猪耳转化系统的建立

通过对影响根癌农杆菌介导蓝猪耳转化效果各种因素的研究,建立了蓝猪耳高效稳定的遗传转化系统。研究结果表明,农杆菌侵染叶片外植体效率最高;外植体预培养不利于农杆菌的侵染;乙酰丁香酮能大大提高根癌农杆菌转化蓝猪耳的效率。另外,菌液浓度、侵染和共培养的时间及再生的途径等均对转化效率有一定的影响。叶片外植体与农杆菌共培养后,经过抗性芽的诱导、根的再生,70d左右就可以获得抗性苗。抗性植株经gus染色、pcr分析和southernblot检测,外源基因已经整合到蓝猪耳基因组中,转化频率为7%～8%。