通过农杆菌介导法将哈兹木霉几丁质酶then-42基因导入核桃

通过根癌农杆菌c58c1athvrifr介导法,利用烟草花叶病毒35s双启动子和苜蓿花叶病毒引导序列控制下的含抗新霉素磷酸转移酶基因(nptⅱ)和哈兹木霉几丁质酶基因(then-42)的质粒pbin19esr为载体,对3个核桃体细胞胚系进行遗传转化,结果获得41个抗卡那霉素的体细胞胚系。经pcr和复式pcr检测,41个转化系均含有nptⅱ基因,其中38个转化系含有then-42基因。southern杂交分析表明,then-42基因已被整合到核桃体的基因组中。几丁质酶活性检测结果表明,转化的体细胞胚系的几丁质酶活性比对照高几十至几千倍。遗传转化的体细胞胚系已萌发成苗。