甜蛋白基因mblii对莴苣的遗传转化

以4日龄莴苣(lactuasatival.)无菌苗子叶为外植体,通过根癌农杆菌介导,成功地进行了马槟榔甜蛋白基因mblii对莴苣的遗传转化。抗生素浓度和子叶外植体与农杆菌的共培养时间是影响转化的重要因素。附加卡那霉素(kan)50mg/l的诱芽培养基msi(ms+naa0.1mg/l+6􀀁ba0.1mg/l+羧卞青霉素500mg/l)最适于侵染后子叶外植体的诱芽培养。在外植体与农杆菌共培养0~7d的范围内,以共培养3d最佳(生芽率58.3%,白化率29%)。1~2cm再生芽移入诱根培养基msii(ms+naa0.05mg/l+kan50mg/l+羧苄青霉素300mg/l)中,诱根率可达100%。获得的抗性植株经组织化学及pcr特异扩增鉴定和统计,7.6%阳性。southernblot结果证明mblii基因已整合到莴苣基因组中。