桂花scot标记体系的建立及其在遗传多样性分析中的应用

以‘籽银桂’桂花叶片dna为材料，以2×estaqmastermix预混液为基本体系，针对影响scot-pcr反应的退火温度、模板dna用量、引物浓度等因素进行优化，建立了适于桂花scot分子标记的反应体系。12μl反应体系含有30ng模板dna，引物浓度为0.4μmol?l-1，不同的引物退火温度分别为48、49.9、54.3或56℃。利用该体系对12个桂花品种进行分析，扩增条带清晰，扩增产物在150~2200bp之间。12条引物共扩增出244条带，其中多态性条带238条，多态性比率为97.47%。在相似系数0.57水平处，‘九龙桂’形成第ⅰ组，其余11个品种形成第ⅱ组。第ⅱ组中‘柳叶桂’、‘香云’、‘早籽黄’、‘大花金桂’、‘桂冠籽金桂’、‘鹅黄’、‘籽金桂’和‘醉云’8个花色不完全相同的品种聚在一起；‘金桂’、‘早银桂’和‘籽银桂’3个不同花色的品种聚在一起，说明品种间的亲缘关系与花色不完全相关，这与其它分子标记结果一致。