柑橘黄化脉明病毒rt-lamp检测方法的建立

柑橘黄脉病由柑橘黄化脉明病毒（citrusyellowveinclearingvirus，cyvcv）引起，是中国近年来新发生的一种柑橘病害。根据cyvcv的外壳蛋白基因序列设计了一组特异性引物，经过一系列条件优化，建立了该病毒的rt-lamp检测方法。结果显示该方法能特异扩增cyvcv，与其他6种柑橘病原物（柑橘衰退病毒、温州蜜柑萎缩病毒、鳞皮病毒、柑橘裂皮病类病毒、柑橘碎叶病毒和柑橘黄龙病菌）不发生反应；灵敏度为rt-pcr的10倍；田间样品的检出率为63.33%，与rt-pcr的结果一致，适用于田间样品的检测。在产物中加入荧光染料sybrgreenⅰ直接用肉眼观察就可判断样品是否感染cyvcv，可省去电泳分析的时间。该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点。