蜡梅cpagl6基因启动子的克隆及功能初步分析

利用hitail-pcr法，从蜡梅（chimonanthuspraecox）基因组中克隆到花发育相关基因cpagl6翻译起始位点上游1266bp的启动子序列。生物信息学分析表明，该启动子序列中存在启动子的基本元件tata-box和caat-box及多个与植物非生物胁迫相关的响应元件。为进一步分析cpagl6启动子的功能，构建该基因启动子与gus基因融合的植物表达载体，并用农杆菌介导法转化烟草。对转基因烟草进行gus组织化学染色及gus酶活性定量检测，结果显示，cpagl6基因启动子能够驱动gus基因在转基因烟草的叶、茎、花中表达，并且在不同花期表达强度存在差异，在根中几乎不表达。转基因植株经黑暗、赤霉素和4℃低温处理后，gus酶活性均有所增加。结果表明，cpagl6启动子主要驱动gus报告基因在花器官和绿色器官组织中表达，推测其在抵抗非生物胁迫中具有重要作用。