番木瓜半胱氨酸蛋白酶基因cpcp的分离及表达分析

采用cdna-aflp技术分离了一个与番木瓜果实成熟衰老相关的差异片段，经生物信息学分析证实该片段属于半胱氨酸蛋白酶（cysteineprotease，cp）基因。将差异片段序列在ncbi中的番木瓜基因组序列中搜索，获得了半胱氨酸蛋白酶基因dna序列。设计开放型阅读框上、下游引物，以木瓜果肉rna逆转录的cdna为模板扩增该基因全长cdna序列，命名为cpcp（登录号：jn689334）。该基因属于c1肽酶家族中的c1a亚家族，编码471个氨基酸，含有家族特有的催化三联体：cys166-his302-asn322。real-timepcr结果显示cpcp在果实中大量表达，是根、茎、叶、花中表达量的几十倍；cpcp受乙烯处理诱导，受1-mcp处理抑制，表达模式与番木瓜果实成熟衰老进程一致，说明cpcp参与了番木瓜果实成熟衰老进程。