山茶花cjapl1基因正义表达载体的构建及对拟南芥的转化分析

为研究山茶花cjapl1基因对于重瓣花形成的作用，构建了pcambia1300-cjapl1正义植物表达载体，酶切结果显示，cjapl1基因正向插入pcambia1300的启动子和终止子之间，表明cjapl1植物表达载体构建成功。将pcambia1300-cjapl1采用农杆菌介导的花序浸染法转化拟南芥，获得转基因阳性植株65株。随机挑选表型变异明显的3株进行pcr扩增都得到了目的条带，southern杂交鉴定进一步确认为转基因阳性植株。同时荧光定量检测到在转基因植株中cjapl1基因表现出较对照显著提高6~25倍的表达量。转基因阳性植株表型变异明显，花柱和雄蕊数相比野生型各增加1枚和1~4枚，萼片边缘发育成白色的瓣化状，表明在拟南芥中过量表达cjapl1基因可以引起花器官形态的变异和数量的变化，因此该基因在花器官形成和重瓣花发育中具有显著的调控功能。