葡萄白粉病菌应答基因vpstart的克隆及表达分析

在前期获得葡萄白粉病菌应答基因vpstart的est基础上，采用race和rt-pcr技术克隆该基因cdna全长序列。vpstart全长1321bp，3′端非编码区114bp，包含一个1206bp开放阅读框，编码401个氨基酸。vpstart蛋白分子量为45.3kd，与欧亚种葡萄、玉米、拟南芥、蒺藜状苜蓿和蓖麻的蛋白同源性分别为99%、64%、58%、46%和25%。实时荧光定量pcr表明，vpstart在‘商–24’葡萄花序、卷须和茎中表达量较高；感白粉病的‘湖南–1’葡萄叶片接种白粉病菌后vpstart表达量与对照没有显著差异，而抗白粉病的‘商–24’葡萄接种12h后vpstart表达量增加，在24~96h表现显著性差异；用sa、meja和eth等不同信号分子分别处理‘湖南–1’和‘商–24’葡萄叶片1~48h后，vpstart基因的表达受sa负调控，受meja和eth正调控。