红皮梨花青苷调控基因pymyba的克隆与表达分析

以红皮梨‘奥冠’为试材，采用rt-pcr结合race技术获得1个myb基因，命名为pymyba。该基因开放读码框共714bp，编码237个氨基酸。pymyba分子量27.4kd，等电点8.78。氨基酸序列分析显示，在其n端具有保守的r2r3-myb结构域，r3-myb结构域含有bhlh结合基序。进化树分析表明，pymyba与花青苷调控myb转录因子的同源性很高。基因表达结果表明，pymyba在梨叶、花、果皮中表达量明显高于果肉，果皮中的表达量与花青苷调控基因pymyb10相比，无显著差异。遮光及meja处理后果皮中pymyba、pymyb10的表达量变化与花青苷合成量变化趋势相似，推测pymyba为梨花青苷合成中重要的正向调控因子。通过原核表达试验获得了该基因的重组蛋白，sds-page电泳检测结果与预期蛋白分子量一致。