紫红线茄转基因体系的优化及基因smarf8基因rna干涉表达载体的遗传转化

建立了以紫红线茄下胚轴为外植体的高效转基因体系。利用该方法，以获得茄子smarf8基因rna干涉转基因植株为目的，构建了以nptⅱ基因为筛选标记的融合表达载体pcambiai35s-2300-smarf8-int，并通过农杆菌介导，侵染茄子下胚轴外植体。含有2mg·l-1吲哚乙酸，0.5mg·l-1玉米素，25mg·l-1卡那霉素和500mg·l-1头孢氨苄的ms选择培养基可直接诱导外植体产生转基因分化苗，再生率达到80%。转基因苗继续生长并在不含激素的ms培养基上产生健壮根系，最终获得转基因株系。rt-pcr和qrt-pcr分析验证了t0代转基因株系中内源基因smarf8被干涉后不表达或表达量降低，southernblot分析显示选择的t0代转基因株系中存在1个t-dna插入拷贝。以上研究结果表明利用建立的转基因体系smarf8基因在茄子中被成功敲除。