芥菜开花负调因子svp及flc同源互作域筛选和作用强度分析

为探明芥菜开花负调因子svp、flc自身聚合的分子机制及其蛋白作用模式，利用酵母双杂交体系，分别对svp、flc蛋白自身聚合及其作用强度进行研究。结果表明：酵母菌y187转化子y187-pgadt7svp和y187-pgadt7svp2~5均能与酵母菌y2hgold转化子y2hgold-pgbkt7svp融合，并可在选择性固体培养基qdo/x/a上长出蓝色菌落，而y187-pgadt7svp1×y2hgold-pgbkt7svp不能在qdo/x/a生长。说明svp蛋白能自身聚合，且与截短体svp2~5同源结合，svp蛋白自身聚合需要核心作用域k域参与。尽管mi域不能单独介导svp自身聚合，但它的存在却能使svp自身聚合作用增强，c域有可能会削弱该作用。同时，y2hgold-pgbkt7flc和y2hgold-pgbkt7flc2~5也能与y187-pgadt7flc融合，同时激活报告基因aur1-c、his3、ade2、mel1，flc能与截短体flc2~5同源互作。k域是flc蛋白自身聚合必须的，i域会增强这一作用。svp和flc的核心作用域k域均由k1、k2和k3亚域组成，形成3个经典的α螺旋，k域有9个高度保守的氨基酸位点及蛋白互作的结构模体（亮氨酸拉链）。