霜霉病菌侵染的黄瓜叶片cdna文库的构建及抗病相关基因筛选

以接种黄瓜霜霉病菌的抗病黄瓜品种‘649’的叶片为材料，使用改良sds法提取总rna，构建黄瓜叶片全长cdna文库，得到的原始文库滴度为5.5×106pfu？ml-1，扩增后的文库滴度达6.5×109pfu？ml-1，重组率约为99%，插入片段在0.5~2.0kb之间，大多在1.0kb左右。随机选取3360个克隆进行测序，共拼接出2507个unigenes，其中包括211个重叠群（contigs）和2296个单拷贝est（singlets）。生物信息学分析显示：这些unigenes中存在427条与植物防御/抗病相关的基因，其中包括两类抗病基因和细胞程序性死亡相关基因，这些基因的发现为下一步研究黄瓜抗病机理，克隆抗霜霉病相关基因提供了重要的参考。