结球甘蓝花粉膜联蛋白基因的克隆及其表达分析

对结球甘蓝（brassicaoleraceal.var.capitatal.）花粉总蛋白双向电泳及差异蛋白质谱分析，发现膜联蛋白在花粉萌发后较萌发前表达下调。通过同源扩增和race等方法首次在结球甘蓝花粉中扩增得到boannexin2基因的cdna序列，该基因cdna全长1157bp，开放阅读框为951bp，编码316个氨基酸残基，预测分子量为36.02kd，等电点6.33。boannexin2编码蛋白c端有4个膜联蛋白重复序列，共2个ⅱ型钙结合区域，在第4个钙结合区位点包含gxxxgxs（t）/dxxg基序。实时荧光定量试验表明，boannexin2在甘蓝成熟未萌发花粉中的表达量是萌发45min后表达量的8倍，表明boannexin2在甘蓝花粉萌发起始阶段起到重要调控作用。