香蕉根系均一化全长cdna文库的构建和鉴定

以香蕉幼苗根系为材料，利用dsn（duplex-specificnuclease）均一化技术与smart（switchingmechanismat5′endofrnatranscript）技术相结合，构建香蕉根系均一化全长cdna文库。经检测，初级文库滴度1.1×106cfu·ml-1，库容5×106个独立克隆，重组率大于95%，插入片段平均长度大于1kb，表明文库质量较好。随机挑取192个克隆进行est（expressedsequencetags）测序，成功获得179个高质量est，含5个conting和174个singlet，冗余度仅为2.35%。小规模测序拼接后获得145个unigenes，对unigenes分析结果表明文库的可靠性好。从序列比对结果中挑选3个与其它植物同源的抗逆基因，利用rt-pcr方法进行了干旱、低温及盐胁迫条件下基因表达分析，结果显示这3个基因在不同的逆境下差异表达。