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科学通报 2000
表皮生长因子受体体外测活的非同位素方法, PP. 2409-2412 Keywords: 表皮生长因子受体,酪氨酸激酶,非同位素,融合蛋白,体外 Abstract: 建立了一种表皮生长因子受体体外测活的非同位素方法.通过克隆表皮生长因子受体主要磷酸化位点Tyr1173周围20肽的基因片段与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白作为底物,用抗磷酸化酪氨酸的单克隆抗体PY99来检测其磷酸化的程度.此方法在专一性及灵敏度上都比已有方法有显著提高.融合蛋白的Km值(10μmol/L)比合成多肽底物的Km值(110μmol/L)要低一个数量级.此方法还可用于测定c-erbB2(Neu/HER2)的酪氨酸激酶活力.
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