鼠伤寒沙门氏菌purB受purR调控的实验证据

通过遗传图和序列同源性分析获得了鼠伤寒沙门氏菌purB核苷酸序列.为揭示鼠伤寒沙门氏菌purB是否受purR调控,对purB基因的PURbox进行了功能分析.PCR扩增野生型PURbox和其第14位保守碱基发生突变(C？T)的DNA片段,分别与从鼠伤寒沙门氏菌野生型菌株LT2提取的purR粗制品进行了凝胶阻滞实验.结果表明,purB基因的PURbox与purR阻遏蛋白有很好的结合能力,而突变的PURbox则不能与purR阻遏蛋白结合.可见,野生型鼠伤寒沙门氏菌purB与嘌呤从头合成途径中其他结构基因一样是受purR基因协同调控的.此外还对不受调控的实验现象的机制做了研究.结果表明purB组成型表达是purB∷MudJ基因融合发生在PURbox上游(-554bp)的结果.这一结果还为鼠伤寒沙门氏菌purB基因与其上游ycfC基因属于同一个操纵子提供了有力的证据.