微载体支持下人肝癌细胞静置三维培养

传统的单层平面培养仍然是目前肝癌研究中最常用的体外培养方法,而这种培养方法不能形成类似体内的结构,在研究体内细胞与细胞、细胞与微环境之间的相互作用等方面存在明显的限制性.以微载体Cytodex-3为支持物,在静置状态下培养人肝癌细胞BEL-7402,构建一种简单易行的人肝癌细胞三维培养模型.电子显微镜、酶活性及流式细胞仪分析表明,细胞呈多面体形,多层重叠排列呈巢状.胞间有0.5~2.0μm的间隙,胞间细胞膜局部突起密切接触,有桥粒形成.90%以上细胞存活,并维持葡萄糖的分解代谢和表达EGF受体.胞内AST,ALT及LDH-L的活性高于平面培养.该三维结构具有体内索状型和实体型肝癌的结构特征,较之单层平面培养,更适合于研究肝癌细胞间及细胞与微环境之间的相互作用,以及用于肝癌细胞浸润、转移和抗药性机理的研究.