应用多波长反常散射法测定耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶的晶体结构

运用基因工程技术,将耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶(TC23O)分子中的甲硫氨酸(Met)全部置换为甲硒氨酸(SeMet).培养出甲硒氨酸置换的耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶(SeMet-TC23O)的晶体.利用同步辐射光源收集了SeMet-TC23O晶体的X射线衍射数据,应用多波长反常散射方法测定了TC23O0.3mm的晶体结构.结果显示,TC23O分子为同源四聚体结构,每个单体由相对独立的N-端结构域(1~153位氨基酸残基)和C-端结构域(153~319位氨基酸残基)构成.每个结构域含有两个在此类酶中具有特征性的βαβββ结构花样.两个结构域可根据分子内非晶体学对称轴近似叠合.