粗穗披碱草1HtS染色体的蛋白质二硫键异构酶基因CAPS标记

中国春粗穗披碱草罗伯逊1HtS·1BL易位系高抗小麦条锈病、叶锈病和白粉病。为了获得抗病小片段易位系，用中国春ph1b基因缺失突变体对1HtS·1BL进行了诱导，获得了大量诱导后代。本研究用位于小麦1DS染色体的87个ESTSTS标记对中国春、粗穗披碱草和1HtS·1BL易位系进行分析，未发现多态性标记。对其中扩增较好的引物BE444859的PCR产物进行随机克隆测序，获得了14个序列，与已发表的小麦蛋白质二硫键异构酶基因序列具有97%以上的同源性,14个序列均包含3个外显子和2个内含子。限制性酶切位点分析表明，仅2个序列含有HaeIII酶切位点。验证实验结果表明，BE444859/HaeIII组合可以在供试材料中获得多态性。进而用BE444859/HaeIII对一套中国春粗穗披碱草附加系和151株诱导后代材料进行分析，结果显示，特异多态性条带仅出现在含1HtS的材料中；68株后代材料均可扩增出多态性带。因此，BE444859/HaeIII可以作为粗穗披碱草蛋白质二硫键异构酶基因CAPS标记，用于检测小麦背景中的1HtS染色体。本研究揭示当杂交亲本间无直接PCR多态性而又需要建立标记时，发展CAPS标记是行之有效的方法。