大麦衔接蛋白AP 3复合体 HvMu3 基因的克隆及表达分析

为研究大麦衔接蛋白AP3复合体的功能，根据Mu3亚基的保守氨基酸序列，借助生物信息学搜索大麦EST序列，拼接了一个大麦（Hordeumvulgare）衔接蛋白AP3复合体Mu3亚基基因（HvMu3），以大麦叶片来源的DNA做为模板，采用RTPCR扩增HvMu3基因。采用半定量RTPCR及荧光定量PCR（qRTPCR）对该基因的组织表达特性以及ABA、NaCl和Cr6+胁迫条件下的表达模式进行分析。结果表明，HvMu3完整阅读框全长为4439bp，包含8外显子和7内含子，编码417个氨基酸残基，其中含有1个MHD结构域，属于衔接蛋白AP3复合体Mu3亚基的典型特征，是首次克隆获得大麦衔接蛋白AP3复合体Mu3亚基基因HvMu3；HvMu3在供试样品的根、茎、叶、胚和胚乳中均能表达，以胚中表达量最高，根、茎和叶次之，胚乳中表达量最低，表明该基因在大麦的旺盛生长组织中表达强烈；HvMu3在大麦幼苗叶片中的表达受ABA、NaCl和Cr6+胁迫诱导，推测其在大麦的生长发育和抵抗逆境胁迫过程中发挥重要作用。