青稞4 香豆酸辅酶A连接酶基因4CL的克隆及表达分析

为了进一步了解4香豆酸辅酶A连接酶（4coumarate:CoAligase;4CL）基因在黄酮合成中的作用，利用RTPCR和cDNA末端快速扩增技术（rapidamplificationofcDNAends,RACE）获得了青稞4CL基因（Hv4CL）的cDNA全长序列，并利用实时荧光定量PCR(quantitativerealtimePCR,qRTPCR)技术，对该基因在青稞4个胚乳发育时间段茎、叶和花中的表达情况进行研究。结果表明，Hv4CL基因cDNA序列全长2107bp，该序列包含一个完整的开放阅读框（ORF，1662bp），编码553个氨基酸。Hv4CL与小麦同源性最高（96%），且该蛋白序列中包含2个保守的box，即AMP结合盒：boxⅠ（SSGTTGLPKGV）和boxⅡ（GEICIRG）。qRTPCR分析结果表明：4CL基因在青稞不同发育时期、不同组织的表达丰度不同，在茎中表达量最高，其次是叶和籽粒。