小麦遗传转化中潮霉素筛选体系的建立及应用

为建立小麦遗传转化中高效的潮霉素筛选体系，以小麦品种郑麦9023的幼胚愈伤组织为材料，探讨了潮霉素浓度、处理时间、恢复培养与否对愈伤组织分化和再生的影响，并对基因枪转化的郑麦9023、邯6172、龙麦30、龙麦31的愈伤组织进行了筛选。结果表明，对小麦幼胚愈伤组织基因枪遗传转化后的筛选以50mg·L-1潮霉素处理30d为宜；恢复培养不能提高筛选阶段愈伤组织的存活率和分化率，但能提高转化后期的成苗率。经过筛选发现郑麦9023抗性愈伤和T0代抗性植株根系及花器官中均有GUS基因的表达；4个小麦品种抗性植株中潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)和候选基因PCR阳性率分别为78.95%和73.68%以上；龙麦30、龙麦31的T1代植株的候选基因PCR阳性率分别在33.33%和73.33%以上，T2代阳性率分别在71.43%和75.00%以上。