小麦叶片瞬时表达体系的优化

为了解决小麦叶片瞬时表达体系所存在的表达效率低、稳定性差、轰击不均匀等问题，利用GFP和GUS作为报告基因，通过改变叶片处理方式、质粒用量、质粒包裹方法和轰击距离，对小麦叶片瞬时表达体系进行优化，并将优化后的体系应用于小麦抗白粉病相关基因的功能鉴定，验证优化体系的有效性。结果表明，与未优化前的方法相比，叶片处理方式为乙醇，质粒用量为每枪1μg，质粒包裹方法采用扩大体系法，轰击距离为9cm时，瞬时表达效率显著提高且轰击更为均匀。应用该体系在感病小麦品种叶片中沉默隐性抗白粉病基因Mlo，显著降低了互作细胞吸器指数，进一步验证了目标基因的功能和优化体系的有效性。