黑麦基因组DNA甲基化修饰位点的MSAP分析

为了获得黑麦基因组DNA甲基化修饰水平、模式及位点等表观遗传信息，采用EcoRⅠ和HpaⅡ/MspⅠ双酶切建立适合于黑麦基因组的“甲基化敏感扩增多态性”（Methylationsensitiveamplificationpolymorphism，MSAP）分析体系，在全基因组水平检测黑麦DNA甲基化修饰位点。以12对MSAP引物进行选择性扩增，共检测到甲基化修饰位点226个，“CCGG/GGCC”位点甲基化修饰比例为51.72%。对部分黑麦基因组甲基化修饰位点进行回收，最终分离了22条存在甲基化修饰的基因组DNA序列。BLAST比对分析结果表明，黑麦基因组中包括转座子序列、散在重复序列以及单拷贝蛋白质编码序列在内的多种类型DNA序列中均存在DNA甲基化修饰现象。同时发现，在甲基化检出序列中都存在明显的“CpG”二核苷酸成簇富集现象，这些区域分布与MSAP分析结果相一致。在此基础上，对应用MSAP技术分离黑麦基因组DNA甲基化修饰位点的有效性以及黑麦基因组序列中DNA甲基化修饰潜在位点分布特征和生物意义进行了讨论。