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麦类作物学报 2009
小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备DOI: 10.7606/j.issn.1009-1041.2009.03.081 Abstract: 为了进一步研究HSP90基因的功能,将WHSP90基因构建到原核表达载体pET-28a(+)中,得到His-WHSP90融合表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,发现1mmol/LIPTG诱导4h蛋白表达量最大;经过蛋白标记亲和层析柱(HisTrapTMHP)纯化得到的纯化蛋白浓度达到0.4mg/mL.免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法检测免疫后家兔抗血清效价大于125000,满足后续试验要求的效价值,为在蛋白水平上研究WHSP90基因功能提供了基础.
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