|
|
麦类作物学报 2007
小麦高分子量谷蛋白亚基1Dx5基因在大肠杆菌中的表达DOI: 10.7606/j.issn.1009-1041.2007.04.143, PP. 597-602 Keywords: 小麦,高分子量谷蛋白亚基,大肠杆菌,表达,小麦品种,高分子量,蛋白亚基,基因产物,转化大肠杆菌,表达条件,Gene,Wheat,Expression,初始浓度,菌液浓度,培养基成分,结果,诱导时间,检测,Western,blot,迁移率,相似,IPTG Abstract: 为了给小麦优质亚基研究奠定基础,将高分子量谷蛋白亚基1Dx5基因的核苷酸序列与载体pRSETA重组,将构建好的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株,通过IPTG使其得到了成功表达.大肠杆菌中表达的1Dx5亚基在SDS-PAGE上与小麦品种钱尼中的1Dx5亚基具有相似的迁移率.用Westernblot技术成功检测到了目的基因产物.通过改变IPTG浓度、诱导时间、培养基成分及初始菌液浓度研究了最适表达条件.结果表明,最适表达条件为:LB培养基,菌液初始浓度(OD600)0.4～0.6,IPTG浓度0.4mmol/L,诱导时间为3～5h.
|
