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麦类作物学报 2007
核蛋白筛选系统(NTT)的建立及鉴定DOI: 10.7606/j.issn.1009-1041.2007.03.095, PP. 386-391 Keywords: 核蛋白,核定位信号,酵母筛选系统,核蛋白,筛选系统,Trap,Transportation,Nuclear,Identification,Construction,意义,机制,作用,胁迫条件,环境,细胞发育,调控,蛋白基因,动态,分离,文库,效率,研究构建 Abstract: 为了研究植物核蛋白的组成及其在各种环境条件下的动态变化,利用核蛋白的核定位信号(nuclearlocalizationsignals,NLS)筛选编码核蛋白的基因,建立了一套快速、省力、低成本的核蛋白筛选系统(nucleartransportationtrap,NTT).通过鉴定发现,将合成的SV40蛋白大T抗原的核定位信号序列插入筛选载体的多克隆位点,转化酵母EGY48,插入核定位信号的筛选载体转化酵母后可以在选择性培养基(SD/His-/Leu-)上生长,而没有插入核定位信号的筛选载体转化酵母后不能在选择性培养基上生长,从而证明此核蛋白筛选系统有效.比较实验表明,本研究构建的核蛋白筛选系统与已报道的系统相比筛选效率更高.利用此系统从cDNA文库中分离编码核蛋白的基因,对于研究核蛋白的动态组成、了解核蛋白基因在调控细胞发育及其环境胁迫条件下的作用机制具有重要的意义.
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