小麦Mlo基因的克隆及白粉病菌诱导下的表达模式分析

为了研究Mlo基因在感、抗小麦品种中的表达情况，根据小麦基因芯片的Mlo探针序列，利用电子克隆与RTPCR方法在感病小麦品种豫麦13和抗病品种红蚰麦中分别克隆到Mlo基因的同源序列。两条核苷酸序列全长均为1605bp，都含有一个完整的ORF(Openreadingframe)。核苷酸序列分析显示二者的DNA序列只有一个核苷酸的差异，与大麦Mlo的相似性均为90%。编码的氨基酸序列包含有7个跨膜结构域，前18个氨基酸是信号肽序列，第414~435位是编码蛋白的活性中心，第451、459、462、475、483位点上有糖基化位点，细胞定位分析将其定位在膜上。从头建模分析构建的二者三维结构有明显差异。利用定量PCR对该基因在白粉菌诱导早期的表达模式进行分析，结果两基因的表达都受白粉菌的诱导，但在红蚰麦中的表达高峰出现在18h，豫麦13中的表达高峰出现在72h，表达时间的差异可能决定了两者对白粉菌的不同抗性反应。